多沙唑嗪对映体在大鼠血浆中的测定及手性转化研究

摘要

目的:建立大鼠血浆中多沙唑嗪对映体的高效液相色谱荧光测定方法,并研究多沙唑嗪对映体在体内和体外的手性转化情况.方法:色谱条件:卵黏蛋白手性色谱柱,柱温30℃;荧光检测激发波长和发射波长分别为255 nm、385 nm;乙腈-磷酸盐缓冲液(15:85 v/v,buffer为20 mmol·L-1的磷酸盐缓冲液,pH 5.32)为流动相,流速0.8mL·min-1;内标为哌唑嗪.体外研究:将分别加入左旋多沙唑嗪、右旋多沙唑嗪的大鼠血浆于37℃水浴温育2天、5天、10天后测定;体内研究:SD大鼠连续口服左旋多沙唑嗪、右旋多沙唑嗪溶液1个月,于最后一次给药8h后腹主动脉取血备用.结果:在上述色谱条件下,各相邻色谱峰间分离度均大于1.5,血浆中内源性物质不干扰多沙唑嗪对映体及内标物的测定.多沙唑嗪两种对映体检测浓度在4～2000 ng·mL-1范围内线性关系良好,左旋多沙唑嗪的回归方程为Y1=0.7986C1+0.0118(r=0.9991),平均回收率为99.5％,RSD为3.6％;右旋多沙唑嗪的回归方程为Y2=0.8025C1+0.0046(r=0.9994),平均回收率为99.3％,RSD为4.3％.多沙唑嗪对映体与大鼠血浆在37℃水浴温育后,直到第10天在大鼠血浆中仍未检测到明显的另一对映体的出现,说明在37℃水浴温育后多沙唑嗪对映体没有发生明显的手性转化;大鼠连续口服左旋或右旋多沙唑嗪1个月,其血浆中未检测到明显的另一对映体的出现,说明给大鼠连续口服一个月的左旋或右旋多沙唑嗪溶液,在其血浆中也未观察到手性转化现象.结论:本文成功地用手性固定相(CSP)高效液相荧光色谱法测定了SD大鼠血浆中多沙唑嗪对映体的浓度.该分析方法准确可靠,选择性强,灵敏度高,重现性好,适用于多沙唑嗪对映体在大鼠血浆中的测定研究,为多沙唑嗪对映体血药浓度的研究提供了依据,为多沙唑嗪对映体的体内分析提供了有效方法.体内、体外研究结果表明多沙唑嗪对映体不易发生相互转化.