P53在高氧致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞KGFR表达变化中的作用研究

摘要

目的：观察胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)角化细胞生长因子受体(KGFR)在高氧暴露过程中表达的变化及其与P53关系的研究。方法：原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,随机分为高氧组,高氧+Pifithrin组和对照组。流式细胞仪检测细胞内ROS水平的变化,Real-time PCR检测KGFR mRNA的表达,Western Blot检测细胞KGFR,P53,P-P53(ser392)蛋白的表达。结果：(1)随着高氧干预时间的延长,肺泡Ⅱ型上皮细胞ROS值逐渐升高[(165.86±5.290)～(920.86±2.896),(P＜0.01)],8h时达极点；(2)与对照组比较,高氧1h时,胎鼠AECⅡKGFR mRNA的表达即明显下降,4h时达极点。高氧1h和4h时,其表达量分别为对照组的0.89倍和0.45倍(P＜0.01)。(3)Western blot结果显示:与对照组比较，高氧4h时，胎鼠AECⅡKGFR蛋白的表达即明显下降，12 h时达极点，以后下降趋势逐渐减弱，高氧4、8、12、24和48 h时，其下降幅度分别为1.3、1.6、1.9、1.3和1.2倍(P<0.O1)。高氧4、8和12h时，高氧组P-P53(ser392)蛋白的表达均明显高于同时间点对照组(P<0.O1)。并且在4h时达到高峰，然后随时间的延长表达逐渐下降:与高氧组比较，高氧+Pifithrin组P-P53(ser392)蛋白的表达明显下降(P＜0.O1)，KGFR蛋白的表达得以恢复(P＜0.O1)。结论：高氧通过激活P53从而抑制AECⅡKGFR的表达。