PSMB9在肝癌形成过程中的表达及其在肝癌细胞中的作用研究

摘要

目的:探讨PSMB9基因在肝癌形成过程中不同阶段的表达情况及其在肝癌细胞中的生物学功能.方法:1)以DEN(二乙基亚硝铵)诱发大鼠肝癌形成为模型,分别检测造模4、8、16、20周后肝脏组织PSMB9基因表达的差异;2)针对PSMB9基因mRNA序列设计2个siRNA靶点,构建重组质粒并经脂质体转染SMMC-7721人肝癌细胞株,并采用实时荧光定量PCR检测PSMB9基因的表达情况,MTT法检测细胞生长增殖情况.结果:1)芯片结果显示,PSMB9基因正常大鼠肝脏组织有一定的表达,造模过程中该表达量逐渐升高,至肝癌形成(造模20周)表达量为正常组的3倍左右;2)经实时荧光定量PCR检测到转染72h后该基因的表达水平明显降低;3)MTT的结果显示,该基因的两个干扰靶点转染144h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制.结论:成功应用DEN诱发大鼠肝癌形成,PSMB9基因在肝癌形成的过程中表达逐渐升高,经进一步生物学功能研究证实,该基因可能与肝癌细胞的恶性增殖有关.