相思子毒素(Abrin)亲和体定点随机突变噬菌体展示文库的构建

摘要

目的：构建相思子毒素亲和体定点随机突变噬菌体展示文库,并筛选出高亲和力的毒素特异识别亲和体.方法：通过定点随机突变获得亲和体基因组合,克隆于噬菌体展示载体,构建噬菌体展示随机组合亲和体文库.以相思子毒素为靶分子对该文库进行3轮亲和筛选,用ELISA鉴定毒素结合活性.结果：成功构建噬菌体展示亲和体随机组合文库,库容量为3.4×107,滴度为4×1014pfu/mL;获得9株高活性亲和体噬菌体抗体,测序结果表明13个位点均发生了突变,突变率100％.结论：通过亲和体噬菌体展示随机组合文库筛选获得了毒素新型抗体——亲和体,获得9种新型亲和体抗体。