羊种布鲁氏菌脂多糖单克隆抗体的制备及特性鉴定

摘要

从布鲁氏菌菌体16M提取脂多糖(LPS),免疫小鼠后取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,经间接ELISA筛选,得到4株稳定分泌抗LPS的单克隆抗体,分别命名为Ⅲ2C3、Ⅱ3E3、Ⅵ4H7、Ⅲ6F2.经鉴定,Ⅱ3E3为IgG1亚类,Ⅲ2C3为IgG3亚类,Ⅵ4H7、Ⅲ6F2为IgM亚类。Ⅲ2C3、6ⅢF2的细胞上清ELISA效价均为1:800,Ⅵ4H7的效价为1:1600,Ⅱ3E3的效价为1:6400.单抗特异性鉴定表明,Ⅲ2C3、Ⅱ3E3仅识别羊种光滑型布鲁氏菌,Ⅵ4H7、Ⅲ6F2除识别羊种光滑型布鲁氏菌外还识别牛种光滑型布鲁氏菌,4株单抗均不识别粗造型布鲁氏菌。Ⅲ2C3、Ⅱ3E3的亲和力(Ka)分别为2.02×107L/mol、7.72×107L/mol.