PCV2对体外培养仔猪肺泡巨噬细胞TLRs基因表达的影响

摘要

本实验主要就PCV2感染后仔猪肺泡巨噬细胞病毒相关TLR mRNA表达量的变化进行检测，旨在探讨PCV2感染后TLR的激活过程。本实验选用6头经ELISA和荧光定量PCR方法检测PCV2和PRRSV血清抗体和抗原双阴性的普通断奶仔猪，无菌分离肺泡巨噬细胞，分为对照组和PCV2感染组，分别在培养0、6、12、24和48h收集各组巨噬细胞。间接免疫荧光定位检测PCV2感染巨噬细胞情况;半定量RT-PCR的方法检测TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8和TLR9 mRNA表达量的变化。结果表明，TLR2 mRNA的表达量在攻毒后6h和24 h时均极显著高于对照组(P<0.0l，在12h时显著高于对照组(P<0.O5);TLR3 mRNA的表达量在攻毒后6h和12h时均显著高于对照组(P<0.O5) ;TLR4 mRNA的表达量在攻毒后12h和24 h时显著高于对照组(P<0.05);TLR7mRNA的表达量在攻毒后12h时极显著高于对照组(P<0.04)，在6h显著高于对照组(P<0.O5) ;TLR8mRNA的表达量在攻毒后12 h时极显著高于对照组(P<0.04)，在6 h显著高于对照组(P<0.05);TLR9mRNA的表达量在攻毒后6h,12h时，均极显著高于对照组(P<0.O1)。结果表明，PCV2可显著影响体外培养仔猪淋巴细胞TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8和TLR9 mRNA的表达，其变化均呈现出先上升后下降的趋势。推断肺泡巨噬细胞对PCV2的天然免疫功能在感染后快速发生变化，但随着PCV2感染时间增加巨噬细胞的天然免疫功能渐渐下降，无法及时有效地清除病毒，这有利于PCV2在肺泡巨噬细胞中的存活和复制。