植物高效序列特异性核酸酶表达载体的构建及应用

摘要

序列特异性核酸酶技术的发展,为基因组定向遗传修饰技术带来了重大突破.目前,如何实现序列特异性核酸酶在目标植物中的高效表达及定向遗传修饰突变体材料的有效筛选,是成功应用序列特异性核酸酶技术进行目标植物基因组定向遗传修饰的关键所在.本研究中,基于pGreen/pSoup双元表达载体系统为基本骨架,针对TALEN及ZFN构成特点,完成了植物高效序列特异性核酸酶双元表达骨架载体的构建.在此基础上,通过进一步融合SSA-YFP报告单元,构建了基于SSA报告系统的目标基因核酸酶选择表达载体.本研究完成构建的序列特异性核酸酶骨架载体的构建,将有效地促进序列特异性核酸酶技术在植物基因组定向修饰研究中的应用,为进一步应用基因组定向修饰技术进行植物基因功能分析、目标性状改良等提供了基本骨架载体工具。