人尿源性干细胞的原代培养研究

摘要

目的:本研究旨在建立一种简便的人尿源性干细胞(human urine-derived stem cells,hUSCs)的原代分离培养及保存方法,为hUSCs的应用奠定基础. 方法:离心分离纯化10位健康成人的尿液进行贴壁培养,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术鉴定表面抗原CD44和CD90,台盼蓝染色法比较不同组别冻存液配方复苏后的细胞存活率,进而确定hUSCs的最佳冻存液配方. 结果:从尿液中成功分离培养人尿源性干细胞并形成集落,MTT法检测人尿源性干细胞生长曲线呈S形显示其具有良好的增殖活性,流式细胞术鉴定表面抗原呈阳性表达,台盼蓝染色法确定配比为DMSO∶FBS∶USCs培养基=1∶4∶5的冻存液细胞存活率最高(P＜0.05),有利于后续实验的进行. 结论:成功建立了一种简便易行的人尿源性干细胞的原代分离培养及保存方法.