同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR的建立及应用

摘要

目的：建立同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR方法,并进行初步应用. 方法：比对NCBI上发表的MVM和MPV基因组序列,设计1对引物和探针,可同时检测MVM和MPV.考察MVM-MPV引物探针的特异性和灵敏度,并对178份清洁级小鼠粪便DNA样本进行检测. 结果：MVM-MPV荧光定量PCR方法最佳线性范围为109～104拷贝/μl,标准曲线的线性关系良好,R2值可达0.99,灵敏度为101拷贝/μl,特异性强.应用MVM-MPV探针对178份小鼠粪便DNA检测,结果为2份阳性样本,经MVM、MPV特异性探针鉴定,2份阳性样本均为MPV感染.阳性样本经全基因组测序后与NCBI网站上MPV(NC_001630.1)序列比对,一致率为96％. 结论：建立的MVM-MPV荧光定量PCR方法,为同时检出小鼠细小病毒和小鼠微小病毒提供了方法.