微透析-HPLC-ECD联用在线测定烟碱暴露大鼠脑内单胺神经递质的动态变化

摘要

为探讨烟碱依赖的形成机理,实时评价烟碱引起的单胺神经递质变化效应,采用在线微透析和高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-ECD)联用方法测定了大鼠脑纹状体中多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量.以2.0μL/min灌流,每15min收集1次透析液并自动注入五氟苯基柱,在梯度洗脱条件下分离检测.结果表明:方法的线性范围为0.2～500.0ng/mL,日内和日间精密度均≤9.7％,加标回收率为86.2％～105.9％,体外透析探针回收率为25.3％～28.3％.以2.0mg/kg烟碱进行腹腔注射后,大鼠纹状体中DA和5-HT的释放增加但未见持续增强,而HVA和5-HIAA的量明显升高.该方法简便快速,灵敏度高,选择性好,适合于烟碱作用下活体动物脑内单胺类神经递质变化的动态分析.