气体信号分子硫化氢对大鼠原代星形胶质细胞自噬的影响

摘要

目的：探讨新型气体信号分子硫化氢(H2S)对SD大鼠原代星形胶质细胞自噬的影响及其机制. 方法：应用外源性H2S供体-硫氢化钠(NaHS)处理细胞,检测自噬相关蛋白Beclin-1、SQSTM1/P62、Atg5表达变化,免疫荧光方法观察星形胶质细胞中自噬颗粒变化,吖啶橙染色检测细胞酸性自噬泡的水平. 结果：NaHS(0、200400、800μmol/)处理细胞1h后,自噬相关蛋白Beclin-1,Atg5表达明显升高,SQSTM1/P62表达下降,并具有浓度依赖性.同时NaHS高浓度处理组星形胶质细胞内LC3绿色荧光斑点明显增加,AO染色结果显示酸性自噬泡(红色)也明显增多,且自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和氯喳(CQ)预处理后加NaHS处理组,与其单独处理组相比,P62蛋白表达升高. 结论：外源性硫化氢能够诱导自噬相关蛋白Beclin-l、Atg5和SQSTM1/P62表达发生改变,并促进IC3B的聚集和自噬泡的形成,表明诱导细胞自噬的活化,但其激活机制和细胞生物学意义有待进一步研究.