糖基氟虫腈与β-葡萄糖苷酶作用方式及水解差异研究

摘要

为明确糖基氟虫腈与β-葡萄糖苷酶作用方式及水解差异,本文以β-葡萄糖苷酶底物pNPG为对照,采用双倒数作图法测定了糖基氟虫腈和pNPG酶代动力学参数,通过同源建模和分子对接试验进一步研究糖基氟虫腈与β-葡萄糖苷酶结合.结果显示:糖基氟虫腈的Km值小于pNPG,但pNPG的反应常数远远大于糖基氟虫腈,表明糖基氟虫腈与pNPG的水解率差异主要由于与β-葡萄糖苷酶解离过程所导致.分子对接表明,与pNPG相比,糖基氟虫腈中苷元的疏水作用在底物与酶的结合中起主要作用,同时氟虫腈部分的结合影响了糖基在β-葡萄糖苷酶活性部位的位置和构型,从而也影响了糖基氟虫腈的反应常数.