猫细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立

摘要

目的：建立猫细小病毒(FPV)的实时荧光定量PCR检测方法,用于FPV的快速检测. 方法：根据GenBank中登陆的FPV NS基因序列(EU659115.1)设计特异性引物和探针,利用分子生物学方法PCR产物连接转化单克隆筛选制备阳性质粒标准品,建立猫细小病毒的荧光定量检测方法,对该方法的特异性、线性、重复性、稳定性和敏感性进行评价. 结果：成功建立了猫细小病毒的荧光定量PCR检测方法,与猫疱疹病毒Ⅰ型无交叉反应,线性范围1011—102copies/μL,重复性较好,批间变异系数小于4％,可实现102copies/μL水平的定量检测. 结论：本实验建立的FPV-q-PCR检测方法具有良好的特异性、稳定性和敏感性.