鸡Ⅶ新城疫病毒融合蛋白F的原核表达及抗其血清的制备

摘要

鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是引起鸡新城疫的病原体.为研究鸡基因Ⅶ新城疫病毒融合蛋白F,本研究通过PCR方法扩增出鸡新城疫Ⅶ的F基因,并采用生物信息学软件对其进行分析,将分析后的F基因的两种基因片段分别连接到pET32-a(+)表达载体上,经转化到大肠杆菌DL21中诱导表达,并对蛋白的表达、可溶性进行鉴定、同时采对纯化后的F蛋白兔疫BALB/C小鼠制备抗血清,采用兔疫印迹方法鉴定抗血清与F蛋白及病毒的反应原性.研究结果为去除了信号肽的F基因片段分别为762bp及1347bp,将其进行表达后蛋白大小分别约为48kDa及68kDa,均为包涵体表达,该蛋白免疫小鼠制备的抗血清可以与F蛋白及NDV病毒反应.结果表明,本研究成功表达了NDVⅦ的F基因并制备了抗血清,研究结果将为新城疫病毒F蛋白的应用及基础研究提供理论参考.