去氢木香内酯对大鼠离体海马脑片氧糖剥夺损伤的保护作用研究

摘要

目的：研究去氢木香内酯(dehydrocostuslactone,DHL)对大鼠离体海马脑片氧糖剥夺损伤的保护作用. 方法：建立大鼠海马脑片氧糖剥夺损伤模型(oxygen glucose deprivation,OGD),将脑片随机分为空白组、模型组、Nimodipine组(10μM)、去氢木香内酯低、中、高剂量组(1、5和10μM).空白组脑片用正常aCSF孵育,持续通入95％O2/5％CO2气体.模型组、Nimodipine组、去氢木香内酯低、中、高剂量组脑片用无糖aCSF进行30minOGD后,转移到95％O2/5％CO2气体环境中复氧复糖孵育1h.1h结束后收集孵育上清液,测孵育上清液LDH的含量;脑片与2％TTC,在37℃条件下避光孵育10min,按重量加入20μl/mg的抽提液(无水乙醇∶DMSO=1∶1),室温密封避光抽提24h,测OD490吸光度值;收集各组脑片,利用western blot技术检测脑片中bax,blc-2,caspase-9,caspase-7和caspase-3的蛋白含量. 结果：与模型组相比,三个药物剂量组均使LDH的释放量减少(P＜0.05),使TTC染色的吸光度值升高(P＜0.05);使bax的蛋白表达均明显降低(P＜0.05),bcl-2的蛋白表达均明显升高;使caspase-9,caspase-7,caspase-3的蛋白表达明显降低(P＜0.05). 结论：去氢木香内酯可以保护海马脑片氧糖剥夺的损伤,其保护机制可能是通过减少细胞LDH的释放量,提高线粒体呼吸酶的活性,以及下调bax,caspase-9,caspase-7,caspase-3和上调blc-2的蛋白表达来实现的.