猪流行性腹泻病毒在微载体培养Vero细胞上的增殖试验

摘要

为了探索猪流行性腹泻病毒(PEDV)在微载体培养Vero细胞上的增殖效果,采用2L生物反应器进行微载体培养Vero细胞和PEDV繁殖,并摸索细胞生长和病毒繁殖的最佳条件,检测病毒滴度,与方瓶培养的病毒滴度进行比较.结果显示:当微载体为5g,种子细胞数约3.05×107个,采用灌注式培养,Vero细胞经72h长满单层,细胞数约为3.02×109个,此时用滴度为104.45TCID50/mL的PEDV1mL感染Vero细胞,培养96h,微载体上80％细胞脱落时收毒,培养的PEDV具有较高的病毒滴度.相同病毒在微载体系统与方瓶上进行同步传代,经检测病毒滴度均有提高,但在微载体系统上培养的PEDV最高滴度可达到106.05TCID50/mL,明显高于方瓶培养.本试验为研究PEDV能更好适应Vero细胞,提高PEDV产量提供技术支持.