SPF鸡人工感染肠炎沙门氏菌死亡率与TLR4基因多态性的研究

摘要

本研究对121只21日龄SPF白菜航鸡感染109CFU肠炎沙门氏菌,并记录攻毒后5天内(DPI)鸡群的死亡情况.利用DNA直接测序技术对感染鸡TLR4基因的全部外显子、部分内含子及5'上游调控区共5500bp序列进行单核苷酸多态性检测,同时选取G219A、G247A、G1028A和A1832G四个SNP位点进行基因分型,比较各个基因型、基因型组合以及单倍型之间死亡率的差异.结果表明,TLR4基因共检测到16个SNPs,其中4个SNPs位于内含子区域,12个SNPs位于外显子区域;TLR4基因219(G219A)位点基因型之间死亡率存在明显的差别:感染后24h、48h和72h,AG基因型死亡率明显低于AA、GG基因型,感染后24h,AG基因型死亡率仅为25％.基因型两两组合表现出组合优势,感染后36h-120h,存在死亡率明显较低的基因型.TLR4基因单倍型组合1,4(AAAG/GGAG)和3,4(AGGA/GGAG)在感染后10h-120h,死亡率均低于其他4种单倍型组合,其中1,4组合(AAAG/GGAG)在感染早期24h时,死亡率仅为6.25％.揭示TLR4基因该位点对沙门氏菌有较强的抗性,并且提示其与沙门氏菌早期感染造成的死亡率有一定关系.本实验为进一步深入研究肠炎沙门氏菌感染后TLR4基因多态性与抗病的关系提供了理论依据.