Nrf2/ARE信号通路在阿霉素诱导的心肌细胞线粒体损伤中的作用

摘要

目的:本研究旨在阐明Nrf2/ARE信号通路在DOX诱导的心肌细胞线粒体毒性中的作用及可能的调节机制,为DOX心脏毒性的防治提供潜在靶标.方法:选用人源心肌细胞系AC16细胞,采用MTT法检测DOX的细胞毒性;Western blot检测DOX对Nrf2和NAD(P)H醌氧化酶(NQ01)蛋白表达的影响;RT-PCR技术检测DOX对Nrf2、NQOI和抗氧化剂血红素加氧酶1(HO-1)mRNA表达的影响;同时采用siRNA转染技术建立Nrf2敲降的细胞模型,观察Nrf2敲降对DOX心肌细胞损伤的影响.结果:MTT结果显示,1000nmol/L的DOX作用于AC16细胞12h,其细胞存活率可维持在80％左右;Western blot结果表明:31.25-1000nmol/L的DOX作用于AC16细胞12h,可呈剂量依赖性地诱导Nrf2蛋白的表达,但随着DOX剂量的增加,Nrf2蛋白的表达量则降低;RT-PCR结果显示,在DOX(0-1000nM)的范围内,Nrf2、NQO1、HOlmRNA的表达也均呈现出先升高后降低的趋势,且在DOX250nM处达最高;Nrf2基因敲降后可进一步加剧DOX诱导的心肌细胞及线粒体的损伤,同时也会抑制Nrf2介导的抗氧化反应过程.结论:Nrf2/ARE信号通路在DOX诱导的心肌线粒体损伤中发挥着积极的保护作用.