抗肝癌人源性噬菌体Fab抗体库的构建和筛选

摘要

噬菌体抗体库技术的发展为人源性抗体的制备提供了新的途径.该技术用逆转录PCR方法,把全套抗体的可变区基因扩增出来,重组到原核表达载体中,并通过与单链噬菌体外壳蛋白pⅢ的融合,把Fab或单链抗体表达在噬菌体的表面,形成噬菌体抗体库.然后用亲和层析的原理,通过重复"吸附-洗脱-扩增"过程,可从容量为108以上的抗体库中将特异性抗体筛选出来.但与制备抗病毒抗体相比,筛选抗肿瘤抗体明显困难.为了获得特异性抗肿瘤抗体,构建高质量的抗体库是其首要条件.本文将人杂交瘤技术中的体外免疫技术引入噬菌体抗体库技术中,构建了"免疫的"人源性噬菌体抗体库,并从构建的抗体库中,筛选到了两株能够与肝癌细胞结合而不与正常肝细胞结合的噬菌体抗体.