人关节软骨细胞的永生化及其表型的诱导

摘要

目的 用基因转染技术使人关节软骨细胞(HACs)向永生化转化,通过诱导使永生化软骨细胞的表则得到维持.方法 利用编码人乳头瘤病毒16型E7基因(HPV16E7)的逆转录表达载体pLXSN转染HACs,挑取转化细胞克隆并扩大增殖,继用核型分析、克隆形成实验、裸鼠致瘤实验检测转化特性.Nutridoma-sp及抗坏血酸盐无血清诱导培养基诱导并维持转化软骨细胞的Ⅱ型胶原表型.结果 HACS被HPV16E7成功转化,目前传代已达50代,转化的HACs为良性转化,诱导培养基能够使转化软骨细胞的Ⅱ型胶原合成增加并维持在正常水平.结论 HPV16E7能够使HACs良性转化并长期培养,经诱导后转化软骨细胞的Ⅱ型胶原表型能够得到很好维持.