小鼠肝炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

摘要

目的：建立小鼠肝炎病毒(MHV)双抗体夹心ELISA检测方法.rn 方法：将4株特异性抗MHV N蛋白的单克隆抗体进行抗体配对试验确定3D4H9为捕获抗体,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的4G9F2为检测抗体;通过方阵试验确定了3D4H9和4G9F2-HRP的最佳工作浓度分别为12.8ng·mL-1和70.84ng·mL-1,以P/N＞2,同时OD 450nm≥0.248作为阳性临界值的判定.该ELISA方法重复性变异系数小于10％,与小鼠细小病毒,仙台病毒,小鼠肺炎病毒,呼肠孤病毒3型等无交叉反应,对358份血清样品进行检测,与美国EBI间接ELISA试剂盒检测结果无明显差异.rn 结论：本研究建立的双抗体夹心ELISA方法检测MHV具有较高的特异性和敏感性,可以用于MHV的病原学检测.