两种巢式PCR检测骨髓移植后慢性粒细胞白血病患者微小残留病的比较

摘要

临床上,骨髓移植(bone marrow transplantation,BMT)是能够治愈慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)的唯一方法.但BMT后存在白血病复发的问题,这是因为体内有残留的白血病细胞,即微小残留病(minimal resid-ual disease,MRD).检测和研究MRD对BMT患者复发监测预后判断和预防治疗等有重要意义.对CML患者BMT后进行MRD检测方法较多,主要有费城染色体分析、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和巢式PCR检测BCR-ABL融合基因等方法.染色体分析和FISH检测需时长,检测的灵敏度低,使其检测MRD应用受到较大的限制,所以多采用巢式PCR检测BCR-ABL融合基因的方法检测CML患者BMT后MRD.目前采用的巢式PCR中的逆转录(reverse transcription,RT)-PCR是两步法RT-PCR,即先在逆转录反应体系中进行逆转录,再将逆转录反应产物加入PCR反应体系中进行PCR,虽然该方法有令人满意的灵敏度和特异性,但不够简便,操作步骤较多,增加了反应污染的机会.我们在巢式PCR检测CML患者BMT后BCR-ABL融合基因时对一步法和两步法RT-PCR的巢式PCR进行比较,本文将实验方法和结果进行了报告。