应用实时荧光PCR方法检测乙型肝炎病毒基因YMDD变异

摘要

<目的>建立一种检测乙型肝炎患者YMDD变异株的方法,并且研究应用拉米夫定治疗及未用药治疗的乙型肝炎初发患者中YMDD变异株发生的情况.[方法]应用用实时荧光聚合酶链反应(PCR)方法对30例未经过任何药物治疗的乙肝初发患者,50例使用拉米夫定治疗一年患者,50例使用拉米夫定治疗两年患者和20例使用拉米夫定与干扰素联合治疗两年的患者同时进行YMDD变异株的检测.[结果]通过对熔解曲线的分析,在未经任何治疗的乙肝初发患者中检出YMDD变异株2例,占6.67﹪;拉米夫定治疗一年的患者中检出YMDD变异株13例,占26.00﹪;拉米夫定治疗两年患者中检出YMDD变异株25例,占50.00﹪,拉米夫定和干扰素联合治疗的患者中检出YMDD变异株9例,占45.00﹪.[结论]在未经任何药物治疗的乙肝患者中即存在YMDD变异株,并且随着使用拉米夫定时间的延长在不断增加,且联合用药并不能减少变异株的发生,因此对乙肝患者在用药前,及用药过程中进行YMDD变异株的检测是非常必要的.而实时荧光PCR方法具有简便、快速、灵敏、经济的特点,特别适用于临床对YMDD变异株的检测,从而及时的指导临床用药.