多重PCR-毛细管电泳法快速检测大豆中转基因成分

摘要

目的:建立抗草甘膦转基因大豆的快速检测方法。rn 方法:针对转基因大豆基因组中被导入的35S启动子、NOS终止子和CP4-EPSPS抗草甘膦基因等外源基因,自行设计引物,采用多重PCR同时扩增上述基因,用激光诱导荧光-毛细管电泳检测PCR扩增产物。对PCR反应条件进行了优化,并与常规的琼脂糖凝胶电泳进行了比较。rn 结果:在优化的PCR反应条件下,经测序证实多重PCR扩增产物与原基因序列完全一致,说明引物设计合理,扩增结果可靠。毛细管电泳与琼脂糖凝胶电泳分析结果一致,但采用毛细管电泳分析,PCR产物样品只需约5nl,分析时间仅24min,而用激光诱导荧光检测大大提高了分析的灵敏度。rn 结论:本方法特异性高,分析时间短,灵敏度,适合于大豆中转基因成分的快速检测。