焦磷酸测序法检测CYP2C19*17基因多态性方法学的建立及可靠性研究

摘要

目的：建立一种快速、高通量的药物代谢酶CYP2C19*17基因多态性的检测方法,为个体化治疗提供用药参考.rn 方法：抽取96例人外周血并提取DNA,应用带生物素标记的扩增引物,经PCR扩增以及亲和素包被的磁珠分离,制备包含有CYP2C19*17位点的焦磷酸测序单链模板，于PyroMark Q24MDx焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,以Sanger测序结果作为对照,观察分析焦磷酸测序准确性及重复性.rn 结果：焦磷酸测序结果与Sanger测序法对比准确性为100％,焦磷酸测序法检测CYP2C19*17位点的重复率也达到100％.建立了基于焦磷酸测序技术的CYP2C19*17多态性位点检测平台.rn 结论：焦磷酸测序法可准确、快速、高通量检测药物代谢酶CYP2C19*17基因多态性,该方法适宜CYP2C19*17这个SNP位点的临床常规检测.焦磷酸检测技术平台在个体化诊断、用药上有较大推广、应用价值.