慢性乙型重型肝炎接受肝移植患者外周血及肝组织中浸润淋巴细胞(LIL)中免疫活性细胞与HBV特异性CTL的对比研究

摘要

目的：更准确地明确慢性乙型重型患者肝内浸润的淋巴细胞（LILs）中免疫活性细胞，包括CD3、CD4和CD8 T淋巴细胞、NK细胞、NKT细胞、B细胞及髓样和浆细胞样树突状细胞(Mdc及Pdc)的频率以及HBV特异性CTL频率和功能，以及它们在慢性乙型重型肝炎发病机理中的作用。方法：通过毛玻璃研磨加自然沉降肝细胞的方法，对11例慢性乙型重型肝炎接受肝移植患者的LiLS进行了提取、分离。通过流式细胞仪对这些患者外周血及LILs中免疫活性细胞的频率进行测定。其中CTLs的测定采用了针对3种不同HLA-A2限制性HBV抗原表位的Fetramers试剂。结果：LILs中CD4 T细胞及B细胞的频率明显低于外周血(P<0．01)，而CD8 T细胞、NK细胞及NKT细胞的频率则明显高于外周血(P<0．05)。L例慢性乙型重型肝炎患者LILs中3种HLA-A02限制的HBV特异性的Tetramer+CD8 T淋巴细胞/CD8 T淋巴细胞在0．23-0．37％,无论是HBsAg或HBcAg，还是HBV特异性多肽，LILs较PBMC产IFN-γ的淋巴细胞要多。结论：慢性乙型重型肝炎患者LILs中CD4 T细胞及B细胞的频率明显低于外周血，而CD8T细胞、NK细胞及NKT细胞则明显高于外周血。与外周血相比，慢性乙型重型肝炎患者LILs中HBV特异性CTL数量要多，功能要强。