Lentivirus(慢病毒)介导表达多基因的人胚基因工程神经干细胞实验研究

摘要

目的：探索以Lentivirus(慢病毒)为载体,构建同时携带并表达多基因的基因工程人胚神经干细胞(HumanNeuralStemCell,hNSC)的可行性,以便为脊髓损伤研究提供材料. 方法：①培养和鉴定hNSC;②用携带绿色荧光蛋白(GreenFluorescenceProtein,GFP)和NT-3的慢病毒转染hNSC;③用荧光显微镜观察、鼠胚背根神经节培养(DorsalRootGanglion,DRG)和Slotblot等方法检测基因工程hNSC的多基因表达. 结果①获得了大量的hNSC;②荧光显微镜观察到几乎100﹪的hNSC表达GFP;③基因工程hNSC的培养液能促使DRG旺盛生长;④SlotBlot检测到基因工程hNSC能高效分泌NT-3蛋白. 结论成功构建了同时携带并稳定表达多基因的基因工程hNSC,为脊髓损伤基础研究及进一步临床应用提供有价值的细胞资源,具有广阔应用前景。