丹酰氯衍生化LC-APCI-MS测定人血浆中超微量炔雌醇及其片剂人体药动学研究

摘要

复方醋酸环丙孕酮片(每片含醋酸环丙孕酮2mg和炔雌醇35 μg)可对女性发挥抗雄激素作用,炔雌醇的临床给药量很小(35μg·d-1),血浆中炔雌醇的浓度极低,外国文献报道其平均最高血药浓度约为90pg·mL-1,其血药浓度测定常用放射免疫法[1～4],最低定量限约为8～20pg·mL-1;Kuhnz等[2]采用GC-MS测定血浆中的炔雌醇,最低定量限为10pg·mL-1。我们采用LC-ESI-MS只能检测到30μg·L-1的炔雌醇甲醇溶液,远达不到所需要的检测灵敏度。有将含有伯、仲氨基、酚羟基的化合物经丹酰氯衍生化后进行荧光、电化学检测的报道。本实验采用丹酞氯作为衍生化试剂与炔雌醇反应后进行LC-APCI-MS测定，衍生化后炔雌醇的质谱响应增大了300倍，最低定量限为10.43 pg.mL-1,满足了药动学测定要求。用上述方法研究20名女性健康受试者口服国产淑普靓和进口达英-35,1片后醋酸环丙孕酮和炔雌醇的体内过程，并对2种复方醋酸环丙孕酮片剂的生物等效性进行评价。