LRP6受体胞内尾区赖氨酸残基和经典Wnt信号通路相关性分析

摘要

目的：Wnt信号通路在肿瘤的发生发展及转移中具有重要作用，探讨LRP6受体胞内尾区赖氨酸残基改变对经典Wnt信号通路影响.rn 方法：构建胞内尾区三个赖氨酸残基(K8R、K48R及K82R)同时突变的突变型LRP6受体,瞬时转染HEK293细胞,运用荧光素酶报告基因技术分析其对β-catenin/TCF转录活性影响;同时运用谷胱甘肽转移酶-E-钙粘蛋白(GST-E-cadherin)结合法提取胞浆游离β-连环蛋白(β-catenin),Western blot法测定总β-连环蛋白、胞浆游离β-连环蛋白、低密度脂蛋白相关受体-6(LRP6)及磷酸化LRP6(p-LRP6)蛋白水平.rn 结果：转染赖氨酸突变的LRP6将进一步增强β-catenin/TCF的转录活性,胞浆游离β-catenin水平将进一步升高.rn 结论：LRP6胞内尾区赖氨酸突变可显著激活Wnt信号通路,这些位点可能在LRP6参与Wnt信号通路活化过程中具有重要作用.