猪圆环病毒Ⅱ型的分离鉴定及其DNA疫苗的初步研究

摘要

对疑似猪断仔猪衰竭综合症的病料进行PCR检测,将PCR检测为阳性的病料接种PK15细胞,盲传6代后通过电镜观察证实分离出PCV2四川毒株1株,命名为PCVwhn株.通过pCR扩增出PCVwhn株的全基因组序列,序列测定结果表明,该毒株的全基因组为1767bp,与国内外分离株的同源率为94.2-97.5﹪.通过PCR方法获取猪圆环病毒PCVwhn株编码CAP蛋白的基因(ORF2),将ORF2基因插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中构建出真核表达质粒pcDNA-PCV-ORF2.将该质粒配制的DNA疫苗肌肉注射免疫小鼠,用ELISA诊断试剂盒检测小白鼠的血液中特异性抗体情况.结果表明,小白鼠在第2周产生了抗猪圆环病毒Ⅱ小型的特异性抗体,第4周抗体水平达到最高,抗体可维持8周以上.