雷帕霉素联合地塞米松抑制糖酵解逆转Raji细胞对雷帕霉素和糖皮质激素耐药

摘要

目的：以Burkitt淋巴瘤Raji细胞株为研究对象,探讨糖酵解通路、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路与糖皮质激素(GC)耐药的关系及机制.rn 方法：用mTOR抑制剂雷帕霉素和/或地塞米松处理Raji细胞,MTT法检测药物对细胞增殖的影响;Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡;PI染色法检测细胞周期改变;Western blot法分析mTOR以及周期、凋亡相关蛋白表达的改变.rn 结果：Raji细胞缺失mTOR信号传导通路下游蛋白4E-BPl表达，因此无p-4E-BP1表达，伴p-p70S6K通路活化。Raji细胞呈现明显的GC和雷帕霉素耐药特性，1μmol/L地塞米松和10μmo1/L雷帕霉素分别作用48h，细胞生长抑制率为8%和14%;当地塞米松浓度高达100μmo1/L时，细胞生长抑制率约24%，雷帕霉素浓度高达1000nmol/L时，细胞生长抑制率约46%;1μmo1/L地塞米松和10nmol/L雷帕霉素联合作用48h，细胞生长明显受抑，生长抑制率为40%，与两药单用相比，P<0.01，计算联合用药的CDI值为0.75,<1，即雷帕霉素和地塞米松可协同作用抑制Raji细胞生长。rn 结论：mTOR激酶激抑制剂雷帕霉素联合GC能高效抑制糖酵解，逆转Raji细胞对GC和雷帕霉素耐药。临床上在耐药Burkitt淋巴瘤化疗方案中加入mTOR抑制剂可望能进一步增加肿瘤对GC的敏感性，有利于提高临床缓解率和长期存活率。