玻璃化法超低温保存荔枝胚性悬浮细胞

摘要

本研究以荔枝(Litchi chinesis Sonn)胚性悬浮细胞为材料,首次研究了荔枝胚性悬浮细胞玻璃化法超低温保存的一些影响因素,通过此项研究,建立了比较适宜于荔枝胚性悬浮细胞的玻璃化法保存方法:将继代培养3d的胚性悬浮细胞,在含有0.4 mol/L山梨醇培养基上预培养2 d后,先在室温下用60％的玻璃化溶液(PVS2)中装载15 min,再用PVS2于0℃下处理15～20 min,换一次新鲜的PVS2溶液后,迅速投入液氮.保存24 h后,在40℃水浴中快速化冻,用1.2 mol/L的蔗糖培养液洗涤2次,经TTC检测,相对存活率达到27.1％.