玻璃化冷冻胚胎管内解冻和直接移植技术的研究

摘要

本实验以昆明白小鼠的桑椹胚和囊胚为模型,研究玻璃化冷冻和管内解冻对胚胎体内外发育率的影响.实验一利用细管法玻璃化冷冻小鼠桑椹胚,在管内配制较大比例0.5M蔗糖溶液,解冻时以稀释玻璃化溶液EFS30.结果表明,解冻后管内停留3(-)16 min的各组胚胎囊胚发育率为92.3％(-)8.4％,孵化率为64.1％(-)75.6％,与对照组(100％,76.2％)无显著性差异(P＞0.05).管内解冻胚胎移植后的妊娠受体产活仔率(58.3％)与新鲜胚胎无显著性差异(54.9％)(P＞0.05).实验二以小鼠囊胚为材料,研究了0PS法管内解冻和直接移植.结果表明,OPS细段总长度为2.5cm,以ED)FS30冷冻液吸入长度小于1cm时,管内解冻后其体外囊胚继续发育率(100％)与管外解冻效果无著性差异(P＞0.05);管内解冻的胚胎以OPS做导管直接移植给假孕受体,移植受体妊娠率(91.67％)和产仔率(42.4％)与新鲜胚胎(90.9％和40.0％)无显著性差异(P＞0.05).综上所述,用EFS30和EDFS30为玻璃化溶液,采用细管法冷和OPS法冻保存小鼠桑椹胚和囊胚,可以成功进大管内解冻和直接移植,可为牛、羊等家畜的胚胎移植提供技术参考.