基于TaqMan-MGB探针FQ-PCR对鸭瘟弱毒苗在皮下注射及其同居鸭体内侵染、增殖和排泄规律研究

摘要

鸭瘟病毒(DPV) Cha株弱毒皮下注射免疫20日龄樱桃谷鸭后,应用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对免疫鸭和同居鸭(第12h开始)第10min、30 min、60 min、90min及12h、24h、6d、9d、12d、21d、36d、60d的心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、法氏囊、哈德氏腺、回盲处、血液、气管、气管分泌液、食管及其分泌液、十二指肠、空肠、回肠、肓肠、直肠及各肠段分泌液中DPV-DNA拷贝数进行检测,结果表明:(1)皮下组:免疫10min后即可在胸腺和血液中检测到DPV-DNA 60min时肾脏中DPV-DNA拷贝数最高;脾(脑、胸腺、法氏囊及哈德氏腺)中DPV-DNA拷贝数于90min分别达到最高且依次降低;12h后所有受检样品中都能检测到DPV-DNA,其中心脏中DPV-DNA拷贝数最高;肠道中DPV-DNA拷贝数在免疫后6-12 d明显高于其它组织,其中盲肠是DPV-DNA拷贝数最高的受检样品.直肠分泌液中DPV-DNA最早于90min检测到.(2)同居组:除回肠分泌液的其它所有受检样品均于12h检测到DPV-DNA,其中肾(脑、气管液和食道液)和空肠液中DPV-DNA拷贝数分别于12h和6d达到最高外,其它检测样品中DPV-DNA拷贝数均于24h达到最高.综上,免疫鸭和同居鸭于免疫早期在包括主要免疫器官在内的各实质器官中的DPV-DNA拷贝数均达到最高是DPV弱毒苗迅速产生免疫力的主要原因.DPV在免疫鸭肠道内的快速分布和增殖并持续向外大量排毒,对免疫鸭免疫效果的增强及对免疫鸭和同居鸭黏膜免疫的产生具有重要意义.