空肠弯曲菌套式PCR快速检测方法的建立及初步应用

摘要

目的:建立套式PCR快速检测实验动物空肠弯曲菌的方法. 方法:根据GenBank数据库的空肠弯曲菌flaA基因设计2对引物,对空肠弯曲菌抽提DNA作PCR扩增及克隆测序.同时,对其他病原菌抽提核酸扩增,并对120份临床样品进行检测. 结果:空肠弯曲菌经2对引物分别扩增出1 719 bp和640 bp片段,与预期大小一致.套式PCR检测的最低限度为10 CFU.整个检测过程可在8 h内完成.而其他病原菌未出现特异性扩增条带.采用套式PCR对121份临床样品进行检测,检出3l份阳性,与传统的细菌分离方法完全一致. 结论:本研究建立的套式PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于实验动物空肠弯曲菌的快速检测.