FAF1高表达对胃癌细胞的影响及其与幽门螺杆菌感染相关关系的研究

摘要

H.pylori感染是否通过影响FAF1表达及其相应信号通路促进胃癌的发生和发展,是本课题需验证的设想.通过荧光定量PCR检测胃勃膜上皮细胞和不同分化程度的胃癌细胞FAF1mRNA的表达水平。检测不同浓度H.pylori感染后细胞的形态及活力、凋亡改变及FAF1表达的变化。构建FAF1慢病毒表达载体，转染HGC-27细胞，分为Lenti-FAF1/HGC-27组(转染Lenti-FAF1)及Lenti-NC/HGC-27组(转染阴性对照病毒Lenti-NC)及HGC-27组，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡、MTT检测细胞增殖活力、克隆形成试验检测细胞成瘤能力。结果表明，FAF1在胃癌细胞系中表达低于正常胃勃膜上皮细胞;其表达水平可能与胃癌细胞的分化程度有关。H.pylori感染可以下调FAF1的表达水平。转染Lenti-FAF1后，胃癌细胞HGC-27 FAF1mRNA和蛋白表达明显上调。FAF1高表达可以抑制胃癌细胞增殖、促进细胞凋亡，抑制胃癌细胞克隆形成率，导致胃癌细胞周期阻滞在G2/M期。FAF1高表达可以抑制裸鼠皮下移植瘤的生长，减低胃癌细胞的异型性及恶性程度，FAF1在胃癌发生发展过程中起重要作用。FAF1高表达能减少H.pylori感染后IL-8及TNF-α的表达水平，减少NF- κB信号通路p65及Iκκβ的表达，H.pylori感染通过降低FAF1的表达，上调p65及Iκκβ的表达，提示H.pylori可下调NF-κB信号通路负调节基因FAF1的表达发挥其致癌作用。