大鼠NT-4基因克隆及表达载体的构建

摘要

目的：克隆大鼠神经营养因子-4(NT-4)全长基因，构建真核细胞表达质粒。rn 方法：用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以大鼠海马总RNA为模板，应用基因重组技术将大鼠神经营养因子-4(NT-4)的全长基因克隆到真核表达载体pcDAN3中，构建重组表达质粒。用限制性内切酶酶切分析和DNA测序对重组质粒载体pcDNA3-NT-4进行鉴定。rn 结果：提取的总RNA电泳出现18S和28S两个条带，PCR扩增目的基因为720bp的条带，测序结果为720bp。rn 结论：正确的克隆了大鼠NT-4基因全序列，为进一步获得重组活性的NT-4蛋白奠定基础。