甲基强的松龙对周围神经损伤后修复的影响及其对体外培养许旺氏细胞增殖的作用

摘要

目的:通过不同剂量甲基强地松龙(以下简称甲强龙)全身及局部应用作用于大鼠损伤后坐骨神经,来衡量甲强龙对周围神经损伤后再生的促进作用及其给药方式和剂量选择.并通过体外培养的方法观察甲强龙对许旺氏细胞增殖的促进作用. 实验Ⅰ 方法:采用28只成年SD雌性大鼠,取股外侧切口,钳夹造成双侧坐骨神经损伤,随机分为4组.创伤后1小时起分别给予A组大剂量(首剂150mg/kg)、B组中剂量(首剂30mg/kg)、C组小剂量(首剂15mg/kg)甲强龙冲击及D组对照溶液(生理盐水与0.9％苯甲醛1∶1混合),并间隔3小时维持肌注,持续24小时.观察各组大鼠一般状态;记录术前及术后4周大鼠足印,测定坐骨神经功能指数(SFI);术后4周显露双侧坐骨神经测定神经传导速度(NCV);钳夹远侧取神经横断切片,锇酸染色观察再生轴索形态,并记数单位面积再生轴索数目,行统计学分析.同时将钳夹部神经纵行切片HE染色,观察各组神经损伤后4周局部免疫反应. 结果:中、小剂量甲强龙组SFI均值优于其他两组,但无统计学差异;中、小剂量组神经诱发电位引出率(100％)明显高于对照组(57.1％)(P＜0.01),小剂量组NCV值优于其他三组且具显著性差异(P＜0.05);中剂量组及小剂量组单位视野再生髓鞘数目明显多于大剂量组及对照组(P均＜0.01),中、小剂量组神经切片轴索再生情况优于大剂量组及对照组.HE染色观察,中、小剂量甲强龙组神经损伤节段免疫细胞浸润少于大剂量甲强龙组及对照组. 实验Ⅱ 方法:采用45只成年SD雄性大鼠,取双侧股外侧切口,钳夹造成双侧坐骨神经损伤,即刻于神经损伤局部肌肉间隙内给予A组大剂量甲强龙、B组小剂量甲强龙,C组地塞米松,D组NGF,E组为对照组且保留五只作为F组正常组.术后4周测定坐骨神经功能指数(SFI);神经传导速度(NCV);行损伤远端神经横切片锇酸染色,计数腓总神经轴索总数及单位视野再生髓鞘数目,并行统计学分析. 结果:SFI测定结果两组甲强龙组明显优于对照组(P＜0.05),且与正常组无显著性差异(P＞0.05).NCV测定结果两组甲强龙组明显优于地塞米松组及对照组(P均＜0.01),显著低于正常组(P＜0.05),与NGF组无显著差异(P＞0.05).大、小剂量甲强龙组及地塞米松组腓总神经轴索总数目明显优于对照组(P均＜0.01),与正常组无显著性差异(P＞0.05);单位视野有髓神经纤维数目大、小剂量甲强龙组均数明显优于地塞米松组及对照组(P均＜0.01),且与正常组无显著性差异(P＞0.05). 实验Ⅲ 方法:取成年SD大鼠坐骨神经以植块法分离纯化许旺氏细胞,将纯化后的细胞培养2周后分为5组移入96孔板:A、B、C组为甲强龙组(按药物浓度分为3组),D组为NGF组和E组为对照组.继续培养9天后倒置显微镜下观察并以MTT法测定各组许旺氏细胞的存活与增殖能力. 结果:倒置显微镜下观察小剂量甲强龙组及NGF组细胞生长优于其他各组.570nm波长分光光度计测定A值.小剂量甲强龙组(0.2μg/ml)明显优于大剂量甲强龙组(20μg/ml),同时优于对照组,余各组间均无明显统计学差异. 实验结论:甲基强的松龙全身及局部应用均可有效促进周围神经损伤后再生,并能够促进体外培养许旺氏细胞增殖从而促进神经损伤的修复,剂量选择不宜过大. 结论:甲强龙全身应用可有效促进周围神经损伤后再生,但剂量选择不应过大,以减少感染及精神症状等副作用.