三种化合物清除自由基能力的高效液相色谱法研究

摘要

目的：采用离线柱前反应，分别建立了高效液相色谱-二极管阵列－电化学联用技术研究没食子酸、鞣花酸和槲皮素清除自由基能力的新方法，并将其用于中草药地锦草清除自由基能力的研究。 方法：采用Gemini-C18 110A(250 mm×4.6 mm，5.0 μm)色谱柱；以甲醇(A)-2％醋酸(B)为流动相，采用梯度洗脱：0 min时A-B(30：70)，7 min时A-B(30：70)，17 min时A-B(75：25)，22 min时A-B(90:10)；流速为0.8 mL·min-1；柱温为25 ℃；二极管阵列检测波长为254 nm；单安培检测工作电位为0.7 V。 结果：没食子酸、鞣花酸及槲皮素的线性范围分别为2.1～63.3 μg·mL-1(r=0.9993)，7.7～230 μg·mL-1(r=0.9990)，2.1～64.1 μg·mL-1(r=0.9990)；三种化合物的回收率分别在96.8～105％(RSD＜2.3％)，97.9～104％(RSD＜2.1％)，97.8～102％(RSD＜2.8％)范围内；没食子酸、鞣花酸、槲皮素对二苯代苦味肼基自由基的清除率和中药材地锦草的平均清除率分别为48.02，69.17，68.06和73.44％。 结论：地锦草和三种化合物清除自由基的能力从强到弱的顺序为：地锦草＞鞣花酸＞槲皮素＞没食子酸。为测定地锦草抗氧化能力提供了依据。