螺旋毛壳ND35几丁质酶的纯化和性质

摘要

以胶体几丁质为诱导物,内生菌螺旋毛壳(Chaetomium spirale)ND35通过在SMCS液体培养基中振荡培养,获得了具几丁质酶活性的粗酶液.经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换层析及Phenyl-Sepharose疏水层析,并通过SDS-PAGE鉴定,纯化了一种分子量约为42kDa的几丁质酶.其最适反应温度为40℃,在30℃以下很稳定;最适pH值为5.5,在pH 5～8.5范围内均较稳定;酶活性受Hg2+、Fe3+、Zn2+、Cu2+、Mg2+等金属离子不同程度的抑制,Na+对酶有轻微的激活作用;以胶体几丁质为底物时,该酶的米氏常数Kn为1.72mg ml-1,最大反应速度Vmax为21.18 U ml-1.