一种基于适配子的荧光定量PCR分析方法

摘要

适配子(aptamer)是通过SELEX体外筛选技术获得的具有识别能力的单链核酸分子.与抗体等传统的生物识别分子相比,适配子表现出更大的技术优势,因此,有关适配子的筛选和应用已成为近年来生物及化学领域的研究热点之一.在这里,我们报道一种基于适配子的荧光定量PCR分析方法的阶段性研究成果.该方法将适配子的识别特性和核酸分子碱基互补特性,和荧光定量PCR信号放大能力、精确定量能力结合在一起,其实验原理如图1所示.设计一条与适配子部分互补的模板分子,将这条模板分子与适配子液相杂交后固定于基质表面,由于适配子与靶分子的结合能力强于互补区的双链结合能力,当靶分子加入时,竞争结合的结果是靶分子与适配子结合,原与适配子结合的模板分子从固相基质上脱落下来,游离于液相中,吸取液相样品,荧光定量PCR操作即可分析靶分子.本文利用这种实验原理,选取了识别ATP的DNA适配子,对ATP进行了检测.