中药胃康宁对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子的影响

摘要

根据中医理论对胃癌的发生与脾虚、气滞、痰积、瘀毒等病理因素密切相关的认识,采用具有健脾解毒散结的中药党参、半枝莲、五灵脂等组成的胃康宁防治胃癌,取得较好疗效,对本方进行了严格、科学的临床与实验研究。现将胃康宁对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子的影响的实验研究报告如下。目的:观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子CyclinD、E、CDK2(Cyclin dependant kinase2, CDK2)CDK4、CDK6和P16、P27mRNA及其蛋白表达的作用。方法:分别与高、中、低不同剂量的胃康宁制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量含药血清培养胃癌细胞,采用免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中CyclinD、E、CDK2、CDK4、CDK6和P16、P27蛋白的表达,RT-PCR法检测各组胃癌细胞中CyclinD、E、CDK2、4、6和P16、P27mRNA的表达。结果:免疫组化法结果显示,胃康宁高、中、低剂量组CyclinE和CDK2,CyclinD2和CDK4、CDK6灰度值均有明显升高,与空白对照组比较(P<0.05-0.01)而P27、P16灰度值则显著降低(P<0.05-0.01),RT-PCR结果显示,胃康宁高、中、低剂量组均能明显降低CyclinE、CDK2、Cy-clinD2和CDK4、CDK6 OPTDl值(P<0.05-0.01),同时升高P27、P16 OPTDl值(P<0.05-0.01)。结论:中药胃康宁可抑制胃癌细胞促细胞周期相关因子CyclinD2mRNA和蛋白的表达,押制CDK4、CDK6 mRNA和蛋白的表达,增强胃癌细胞抑制因子P16蛋白的表达。同时,中药胃康宁含药血清能抑制胃癌细胞促进周期相关因子CyclinE及CDK2mRNA和蛋白的表达,增强胃癌细胞抑制因子P27mRNA和蛋白的表达。这可能是胃康宁抑制胃癌细胞生长的作用机制。