重组人干扰素epsilon在大肠杆菌中的表达、纯化及生物学特性研究

摘要

目的：表达并纯化人干扰素IFN-ε，并对其理化特性和生物学特性进行初步的研究。rn 方法：利用PCR技术以人基因组DNA为模板，获得目的片段的全基因序列后，克隆到原核表达载体PET32a+上，构建表达载体PET32a+/IFN-ε，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达，产物的表达形式为包涵体。经过纯化复性后，获得高纯度的活性蛋白IFN-ε。对IFN-ε的理化性质和抗病毒活性、抑制肿瘤细胞增长活性、刺激细胞产生抗病毒蛋白的活性进行了鉴定。rn 结果: IFN-ε以包涵体形式表达，纯化后纯度大于95％，抗病毒活性为1.2×105IU/mg，能够抑制肿瘤细胞的生长，并能诱导细胞产生抗病毒蛋白MxA。rn 结论: 成功表达了人干扰素IFN-ε蛋白，并证明此蛋白具有抗病毒和抗细胞增殖的活性。