慢性粒细胞性白血病干细胞抗伊马替尼机制的初步研究

摘要

目的:探讨氟波酯(12-0-tetradecanoylphorbol-13-acetate, TPA)联合常规剂量的伊马替尼对进入急变期且对常规剂量的伊马替尼已产生耐药的慢性粒细胞性白血病(chronic myelogenousleukemia, CML)的疗效及可能机制。方法:1. BCR/ABL<'+>Flkl<'+>CD34<'->CML白血病干细胞的分离和培养:取耐伊马替尼、处于急变期CML患者骨髓,用CD45、GlyA及CD34免疫磁珠阴性选择经Ficoll-Paque分离液梯度分离得到的骨髓源单个核细胞后,将阴性选择所得细胞接种在96孔细胞培养板中(每孔l个细胞),96孔板预先以ECM胶(含5ng/mL BMP-4,30ng/mL SCF, 10ng/mL LIF及3﹪FCS)铺板,20天后,挑取单克隆细胞,扩增备用:2.耐药性检测:采用流式细胞术将BCR/ABL<'+>Flkl<'+>CD34<'->细胞分为三个亚群,即Go期、Gl期及S/G2+M细胞,分别评估TPA、伊马替尼、TPA联合伊马替尼对三个亚群细胞的体外增殖及凋亡的影响:3.观察TPA(0.063mg/m<'2>/d)联合伊马替尼(400mg/d)对进入急变期且对伊马替尼(400mg/d)已产生耐药的9名CML的疗效。