高效液相色谱-四级杆/静电场轨道肼高分辨率质谱检测蜂蜜中的焦糖色素

摘要

建立了高效液相色谱-四级杆/静电场轨道肼高分辨率质谱法直接测定蜂蜜中焦糖色素的方法.用水溶解蜂蜜样品,经0.22μm粒径的微孔膜过滤后,采用Agilent HILIC Plus(2.1mm×100mm,3.5μm)色谱柱进行分离,以体积比为8:2的乙腈与5 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行等度洗脱.质谱采用正离子模式,在质荷比(m/z)50～400范围内通过高分辨质谱全扫描模式提取目标化合物的精确质量数.在所建立的色谱条件下,4-甲基咪唑(4-MI)和2-甲基咪唑(2-MI)能够得到较好的分离,高分辨率质谱提取的质量准确度小于5×10-6(5ppm).该方法对4-MI的检测限可达50 μg/kg,对2-MI 的检测限可达25μg/kg.两种待测物质采用外标法定量,线性良好,相关系数均大于0.99.通过加标验证,在50、100和150μg/kg 三个加标水平下,蜂蜜中4-MI和2-MI的平均回收率为83.7％～109.6％,相对标准偏差(RSD)小于9.2％.该方法样品处理过程简单,不使用有机溶剂,灵敏度高,适用于任何蜜种的测定,可以作为蜂蜜中是否掺入焦糖色素的检测方法.利用该方法对国内外各地区12个蜜种的30个蜂蜜样品进行检测,均未检出4-MI和2-MI.