PEDV S蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定

摘要

以猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)S基因的免疫优势区S1(1bp～2367 bp)为靶基因，利用基于gIII表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统，构建S1基因噬菌体展示肽库，以纯化的兔抗PEDV多克隆血清为靶蛋白对S1基因噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选，结果获得3个高亲和力的序列，分别命名为S1P1(248aa～280aa)、S1P2(442aa～499aa)和S1P3(697aa～742aa)。ELISA和Western blot结果显示，S1P1、S1P2和S1P3短肽都能被兔抗PEDV多克隆血清识别，其中S1P3反应性最强。为了进一步揭示S1P1、S1P2和S1P3短肽的抗原性，3个短肽GST融合蛋白和它们串连后GST融合蛋白的单因子血清被制备，间接免疫荧光试验(IFA)结果证实，抗S1P2-GST、S1P3-GST和S1P123-GST融合蛋白的单因子血清能够识别Vero细胞培养物中天然的PEDV。