猪传染性胃肠炎病毒n基因的原核表达及重组蛋白的免疫活性分析

摘要

以猪传染性胃肠炎病毒标准华毒株H的n基因重组质粒pMD1-TN为模板，通过PCR扩增出1149bp大小的n基因，然后将其亚克隆到pET-30a原核表达载体，成功地构建了TGEV n基因的原核表达载体pET30a-N，重组质粒转化E.coli BL21感受态细胞,用IPTG进行诱导表达，经SDS2PAGE分析表明TGEV N蛋白在大肠杆菌中获得了融合表达。通过Western blot试验检测表明：重组N蛋白与TGEV阳性血清具有很强反应性重组N蛋白的高免血清能够识别TGEV的N蛋白，说明利用大肠杆菌表达的TGEV N蛋白具有良好的免疫活性。