胆囊切除未通过改变肠道菌群而影响动脉粥样硬化发展

摘要

本研究拟探讨胆囊切除术后对肠道菌群丰富度和多样性的影响,是否进一步影响动脉粥样硬化斑块的形成.60只雄性日本大耳白兔,给予高胆固醇饲料(含有0.5％胆固醇、3％大豆油、96.5％基础饲料)喂养两周,筛选出对胆固醇反应性较为一致的家兔34只,随机分为普食假手术组、普食胆囊切除术组、高脂假手术组和高脂胆囊切除术组四组,持续喂养12周.手术前和手术后每2周检测一次家兔的血脂(总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇).实验结束时检测家兔的肝脏功能,常规石蜡切片HE染色观察肝脏的组织学变化;苏丹Ⅳ染色分析主动脉树大体斑块面积;HE、弹力纤维染色(EVG),在光学显微镜下分析主动脉弓部内膜下病变面积;免疫组化用巨噬细胞及平滑肌细胞抗体检测并分析动脉粥样硬化斑块的细胞组成.从家兔12周的粪便中提取基因组DNA,然后用16SrDNA V4区通用引物进行PCR扩增,扩增产物采用Illumina平台二代测序仪MiSeq250PE进行测序并分析肠道菌群的丰富度和多样性.胆囊切除术对动脉粥样硬化和肠道菌群均无明显的影响;而高脂饮食对肠道菌群的种类和数量有不同程度的影响。