银杏花色素合成酶基因的克隆与表达分析

摘要

利用RACE技术首次从裸子植物银杏中克隆得到一个花色素合成酶基因GbANS的cDNA全长(EU600206)和基因组序列(EU600205).GbANS基因全长cDNA为1301 bp,含有一个1062 bp的ORF,编码354个氨基酸.蛋白序列多重比对结果表明,GbANS蛋白与其他植物的ANS蛋白具有很高的相似性,GbANS存在结合亚铁离子(H-X-D)和酮戊二酸(R-X-S)的保守位点.GbANS基因基因组序列含有3个外显子和2个内含子.同源建模产生的GbANS三维结构与功能已知的拟南芥ANS(AtANS)的三维结构一样,具有2-ODD酶特征性的扭曲果冻状结构.类黄酮特异2-ODD酶进化树分析表明,GbANS与其他植物的ANS具有共同的祖先.Real-timePCR分析表明,GbANS基因的表达水平在不同器官以及器官不同时期均有差异性,在成熟果中的表达量最高,胚珠和雄蕊,茎和根中未检测到有表达,花青苷在各器官中的积累与GbANS基因器官与发育表达图谱显示出显著的一致性.