实时定量双重荧光PCR方法检测牛分支杆菌引起的猪结核病的研究

摘要

目的建立一种快速有效地检测由牛分支杆菌引起的出口牲猪结核病的实时定量双重荧光PCR检测方法。方法以牛分支杆菌16S rRNA基因和IS6110因为靶序列，建立实时定量双重荧光PCR方法;通过敏感性实验、特异性和干扰实验等验证所建方法的敏感性、特异性、稳定性;尝试用5种方法对牲猪结核病疑似病料组织进行DNA提取;用建立的方法对搜集的猪结核病疑似病料进行检测并与剖解方法和分离培养方法进行比较。结果建立的方法稳定性强、特异性和敏感性好。结论建立的实时定量双重荧光PCR方法可快速、敏感，特异地检测由牛分支杆菌引起的出口牲猪结核病。